【儀器設(shè)備網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】黑小麥中γ-氨基丁酸(GABA)具有促進(jìn)記憶力、降壓、改善腦活力、緩解焦慮和頭痛等功能。本文實(shí)驗(yàn)以運(yùn)黑161為材料，采用微酸性電解水浸泡處理，將谷氨酸鈉、磷酸吡哆醛、氯化鈣、氯化鈉4種培養(yǎng)組分列為考察因素，做一系列單因素試驗(yàn)，確定考察因素對黑小麥GABA的影響，以便為黑小麥功能性產(chǎn)品開發(fā)提供理論支持。

材料與方法：

1、材料

運(yùn)黑161、GABA標(biāo)準(zhǔn)品

2、儀器設(shè)備

高速離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、真空冷凍干燥機(jī)、上海元析UV-9000S紫外可見分光光度計

實(shí)驗(yàn)部分：

1、黑小麥芽的制備

挑選籽粒飽滿、無蛀蟲、無霉?fàn)€的“運(yùn)黑161”，分別稱取25.0±0.01g該黑小麥種子于100ml燒杯中。用自制微酸性電解水(pH5.55、有效氯濃度22.4mg/L)對種子浸泡消毒1h。用相應(yīng)培養(yǎng)液以料液比1:2對種子浸泡8h，將浸泡后的種子均勻平鋪在底部有孔的發(fā)芽盒中，于恒溫箱(20℃)進(jìn)行避光培養(yǎng)。培養(yǎng)期間每天用相應(yīng)培養(yǎng)液淋澆3次，對照組用等量去離子水淋澆，培養(yǎng)5天后進(jìn)行采收。

2、培養(yǎng)液成分對黑小麥芽GABA含量的影響

2.1培養(yǎng)液制備

配置質(zhì)量濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/mL谷氨酸鈉溶液，濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mol/L氯化鈣溶液，濃度分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mol/L磷酸吡哆醛溶液，濃度分別為5、50、100、150、200、250mol/L氯化鈉溶液。采收后的黑小麥芽速凍后于真空冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行凍干，磨成粉狀后于4℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線建立

配置不同濃度的GABA標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取1ml，分別加入0.60ml 0.20mol/L硼酸鹽緩沖液，搖勻后加入2mL5%苯酚溶液，搖勻，加入1mL7%次氯酸鈉溶液混勻，用沸水加熱5min，直到溶液變?yōu)樗{(lán)綠色，將其放入碎冰中冷卻至室溫。用紫外分光光度計在645nm處測定吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.3樣品GABA含量的測定

準(zhǔn)確稱取0.50g黑小麥芽粉樣品，加5mL蒸餾水，在往復(fù)振蕩器震蕩提取4h，上層清液于10000r/min離心3min。用移液槍取1mL上層清液于10mL容量瓶中，按測定標(biāo)準(zhǔn)品的方法在光度計波長645nm處測定樣品中GABA含量。

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