【分析儀器網(wǎng) 專題推薦】GB 31650-2019《食品安全國家標準食品中獸藥zui大殘留限量》中明確規(guī)定了環(huán)丙氨嗪在動物靶組織中的殘留限量，并且規(guī)定泌乳期禁用。本文闡述了如何將環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺從樣品基質(zhì)中分離提取出來，并經(jīng)過凈化后，轉(zhuǎn)化成液質(zhì)聯(lián)用儀可以檢測的形式。以提取、凈化為重點，依據(jù)國標GB 29704-2013，為檢測人員和相關領域研究人員提供一定的參考。

　　檢測項目：環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺

　　應用范圍：雞的肌肉、腎臟和蛋

　　超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

　　方法原理：試料中殘留的環(huán)丙氨嗪及代謝物三聚氰胺，用3 %三氯乙酸溶液提取，MCX柱凈化，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標法定量。

　　前處理儀器：

　　分析天平(感量0.00001 g和0.01 g);渦旋混合器;離心機;氮吹儀;離心管(50 mL)，微孔濾頭(0.2 μm);固相萃取裝置。

　　儀器儀表設備：UHPLC-MS/MS+ESI源

　　樣品的制備與保存：

　　1. 雞蛋

　　取新鮮或冷凍kong白或供試雞蛋，去殼，并使均質(zhì)。

　　取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試試料;

　　取均質(zhì)后的kong白樣品，作為kong白試料;

　　取均質(zhì)后的kong白樣品，添加適宜濃度的標準工作液，作為kong白添加試料。

　　2. 雞的肌肉和腎臟組織

　　取新鮮或冷凍kong白或供試組織，絞碎，并使均質(zhì)。

　　取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試試料;

　　取均質(zhì)后的kong白樣品，作為kong白試料;

　　取均質(zhì)后的kong白樣品，添加適宜濃度的標準工作液，作為kong白添加試料。

　　所有試料在零下20 ℃ 以下保存。

　　前處理方法：

　　1.提取

　　稱取試料2 g±0.02 g，于50 mL離心管中，加3 %三氯乙酸溶液20 mL，渦旋混合30 s，超聲10 min，靜置10 min，10000 r/min離心10 min，取上層液，備用。

　　2.凈化

　　MCX柱(60 mg，3 mL)依次用甲醇3 mL和水3 mL活化，取備用液10 mL過柱，加2 %甲酸水溶液3 mL、甲醇3 mL淋洗，抽干，加5 %氨化甲醇溶液3 mL洗脫，抽干，收集洗脫液，于50 ℃ 氮氣吹干，用50 %乙腈水溶液1.0 mL溶解殘余物，濾膜過濾，供液質(zhì)測定。

　　國標解讀及注意事項：

　　NO.1

　　1.標準物質(zhì)用50 %乙腈水溶液配成1 mg/mL標準儲備液，在2 ℃～8 ℃避光保存，可使用3個月。

　　NO.2

　　2.本方法使用三氯乙酸溶液提取目標化合物，陽離子交換柱進行富集凈化，稀釋倍數(shù)=2，相當于1 g試料進行上機檢測。

　　NO.3

　　3.固相萃取過程中需要控制流速，使溶液一滴一滴地流下，以保證離子交換的效果。

　　NO.4

　　4.氨水甲醇溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，避免氨水揮發(fā)，影響洗脫效果;洗脫過程中洗脫溶劑少量多次加入，可以增加洗脫率。

　　NO.5

　　5.由于環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺極性比較強，建議選用長的(150 mm)親水型色譜柱，保證色譜峰的保留效果。

　　NO.6

　　6.本方法使用基質(zhì)曲線進行定量，還可以使用環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺相對應的同位素內(nèi)標配制標準曲線。

　　參考文獻：

　　GB 29704-2013 食品安全國家標準 動物性食品中環(huán)丙氨嗪及代謝物三聚氰胺多殘留的測定 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法